食品微生物實驗室主要負責(zé)各類微生物項目的檢測,主要檢測項目有菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌、酵母、乳酸菌、雙歧桿菌、罐頭商業(yè)無菌、致病菌(如沙門氏菌、志賀氏菌、溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌等)。
微生物實驗室由準(zhǔn)備室、洗滌室、滅菌室、無菌室、恒溫培養(yǎng)室和普通實驗室六部分組成。這些房間的共同特點是地板和墻壁的質(zhì)地光滑堅硬,儀器和設(shè)備的陳設(shè)簡潔,便于打掃衛(wèi)生。
微生物實驗室選址
三級生物安全防護實驗室可與其他用途房屋設(shè)在一棟建筑物中,但必須自成一區(qū)。該區(qū)通過隔離門與公共走廊或公共部位相隔。
微生物實驗室功能分區(qū)
平面布局
三級生物安全防護實驗室的核心區(qū)包括實驗間及與之相連的緩沖間;緩沖間形成進入實驗間的通道。必須設(shè)兩道連鎖門,當(dāng)其中一道門打開時,另一道門自動處于關(guān)閉狀態(tài)。如使用電動連鎖裝置,斷電時兩道門均必須處于可打開狀態(tài)。在緩沖間可進行二次更衣;當(dāng)實驗室的通風(fēng)系統(tǒng)不設(shè)自動控制裝置時,緩沖間面積不宜過大,不宜超過實驗間面積的八分之一;Ⅱ級或Ⅲ級生物安全柜的安裝位置應(yīng)遠離實驗間入口,避開工作人員頻繁走動的區(qū)域,且有利于形成氣流由“清潔”區(qū)域流向“污染”區(qū)域的氣流流型。
準(zhǔn)備室
準(zhǔn)備室用于配制培養(yǎng)基和樣品處理等。室內(nèi)設(shè)有試劑柜、存放器具或材料的專柜、實驗臺、電爐、冰箱和上下水道、電源等。
洗滌室
洗滌室用于洗刷器皿等。由于使用過的器皿已被微生物污染,有時還會存在病原微生物。因此,在條件允許的情況下,最好設(shè)置洗滌室。室內(nèi)應(yīng)備有加熱器、蒸鍋,洗刷器皿用的盆、桶等,還應(yīng)有各種瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。
滅菌室
滅菌室主要用于培養(yǎng)基的滅菌和各種器具的滅菌,室內(nèi)應(yīng)備有高壓蒸汽滅菌器、烘箱等滅菌設(shè)備及設(shè)施。
無菌室
無菌室一般為4 - 5 平方米、高 2.5 米的獨立小房間(與外間隔離),專辟于微生物實驗室內(nèi)。
無菌室也稱接種室,是系統(tǒng)接種、純化菌種等無菌操作的專用實驗室。在微生物工作中,菌種的接種移植是一項主要操作,這項操作的特點就是要保證菌種純種,防止雜菌的污染。在一般環(huán)境的空氣中,由于存在許多塵埃和雜菌,很易造成污染,對接種工作干擾很大。
1.無菌室的設(shè)置
無菌室應(yīng)根據(jù)既經(jīng)濟又科學(xué)的原則來設(shè)置。其基本要求有以下幾點:
(1)無菌室應(yīng)有內(nèi)、外兩間,內(nèi)間是無菌室,外間是緩沖室。房間容積不宜過大,以便于空氣滅菌。最小內(nèi)間面積2×2.5=5m2,外間面積1×2=2m2,高以2.5m以下為宜,都應(yīng)有天花板。
(2)內(nèi)間應(yīng)當(dāng)設(shè)拉門,以減少空氣的波動,門應(yīng)設(shè)在離工作臺最遠的位置上;外間的門最好也用拉門,要設(shè)在距內(nèi)間最遠的位置上。
(3)在分隔內(nèi)間與外間的墻壁或“隔扇”上,應(yīng)開一個小窗,作接種過程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道,以減少人員進出內(nèi)間的次數(shù),降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm,內(nèi)外都掛對拉的窗扇。
(4)無菌室容積小而嚴(yán)密,使用一段時間后,室內(nèi)溫度很高,故應(yīng)設(shè)置通氣窗。通氣窗應(yīng)設(shè)在內(nèi)室進門處的頂棚上(即離工作臺最遠的位置),最好為雙層結(jié)構(gòu),外層為百葉窗,內(nèi)層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內(nèi)室使用后、滅菌前開啟,以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機。
2.無菌室內(nèi)設(shè)備和用具
(1)無菌室內(nèi)的工作臺,不論是什么材質(zhì)、用途的,都要求表面光滑和臺面水平。
(2)在內(nèi)室和外室各安裝一個紫外燈(多為30W)。內(nèi)室的紫外線燈應(yīng)安裝在經(jīng)常工作的座位正上方,離地面2m,外室的紫外線燈可安裝在外室中央。
(3)外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。
(4)內(nèi)室應(yīng)有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標(biāo)簽紙、膠水、廢物筐等。
3.無菌室的滅菌消毒
(1)薰蒸:這是無菌室徹底滅菌的措施。無菌室使用了較長時間,污染比較嚴(yán)重時,應(yīng)進行薰蒸滅菌??捎眉兹?、乳酸或硫磺薰蒸。
(2)噴霧:在每次使用無菌室前進行。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降,防止桌面、地面上的微塵飛場,并有殺菌作用??捎?%石炭酸噴霧。
(3)紫外線照射:在每次使用無菌室前進行。紫外線有較好的殺菌效果。通常應(yīng)開啟紫外線燈照射30~60min。
4.無菌室工作規(guī)程
(1)無菌室滅菌。每次使用前開啟紫外線燈照射30min以上,或在使用前30min,對內(nèi)外室用5%石炭酸噴霧。
(2)用肥皂洗手后,把所需器材搬入外室;在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋,戴好口罩,然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘。
(3)將各種需用物品搬進內(nèi)室清點、就位,用5%石炭酸在工作臺面上方和操作員站位空間噴霧,返回外室,5~10min后再進內(nèi)室工作。
(4)接種操作前,用70%酒精棉球擦手;進行無菌操作時,動作要輕緩,盡量減少空氣波動和地面揚塵。
(5)工作中應(yīng)注意安全。如遇棉塞著火,用手緊握或用濕布包
裹熄滅,切勿用嘴吹,以免擴大燃燒;如遇有菌培養(yǎng)物灑落或打碎有菌容器時,應(yīng)用浸潤5%石炭酸的抹布包裹后,并用浸潤5%石炭酸的抹布擦拭臺面或地面,用酒精棉球擦手后再繼續(xù)操作。
(6)工作結(jié)束,立即將臺面收拾干凈,將不應(yīng)在無菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無菌室后,對無菌室用5%石炭酸噴霧,或開紫外線燈照射30min。
恒溫培養(yǎng)室
1.培養(yǎng)室的設(shè)置
(1)培養(yǎng)室應(yīng)有內(nèi)、外兩間,內(nèi)室是培養(yǎng)室,外室是緩沖室。房間容積不宜大,以利于空氣滅菌,內(nèi)室面積在3.2×4.4=14m2左右,外室面積在3.2×1.8=6m2左右,高以2.5m左右為宜,都應(yīng)有天花板。
(2)分隔內(nèi)室與外室的墻壁上部應(yīng)設(shè)帶空氣過濾裝置的通風(fēng)口。 (3)為滿足微生物對溫度的需要,需安裝恒溫恒濕機。 (4)內(nèi)外室都應(yīng)在室中央安裝紫外線燈,以供滅菌用。
2.培養(yǎng)室內(nèi)設(shè)備及用具
(1)內(nèi)室通常配備培養(yǎng)架和搖瓶機(搖床)。常用的搖瓶機有旋轉(zhuǎn)式、往復(fù)式兩種。
(2)外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、手持噴霧器和5%石炭酸溶液、70%酒精棉球等。
3.培養(yǎng)室的滅菌、消毒
同無菌室的滅菌、消毒措施。
小規(guī)模的培養(yǎng)可不啟用恒溫培養(yǎng)室,而在恒溫培養(yǎng)箱中進行。
普通實驗室
進行微生物的觀察、計數(shù)和生理生化測定工作的場所。室內(nèi)的陳設(shè)因工作側(cè)重點不同而有很大的差異。一般均配備實驗臺、顯微鏡、柜子及凳子。實驗臺要求平整、光滑,實驗柜要足以容納日常使用的用具及藥品等。
更衣室
是進入無菌室之前工作人員進行更衣、洗手的地方。室內(nèi)設(shè)置無菌室及緩沖室的電源控制開關(guān)和放置無菌操作時穿的工作服、鞋、帽子、口罩等。
辦公室
登記待檢驗樣品;出檢測報告;處理有關(guān)文件資料;放松休息等
微生物實驗室通風(fēng)空調(diào)
1.必須安裝獨立的通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)以控制實驗室氣流方向和壓強梯度。該系統(tǒng)必須確保實驗室使用時,室內(nèi)空氣除通過排風(fēng)管道經(jīng)高效過濾排出外,不得從實驗室的其他部位或縫隙排向室外;同時確保實驗室內(nèi)的氣流由“清潔”區(qū)域流向“污染”區(qū)域。進風(fēng)口和排風(fēng)口的布局應(yīng)使實驗區(qū)內(nèi)的死空間降低到最小程度。
2.通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)為直排系統(tǒng),不得采用部分回風(fēng)系統(tǒng)。
3.環(huán)境參數(shù):相對于實驗室外部,實驗室內(nèi)部保持負壓。實驗間的相對壓強以-30Pa~-40Pa為宜,緩沖間的相對壓強以-15Pa~-20Pa為宜。實驗室內(nèi)的溫、濕度以控制在人體舒適范圍為宜,或根據(jù)工藝要求而定。實驗室內(nèi)的空氣潔凈度以GB 50073—2001《潔凈廠房設(shè)計規(guī)范》中所定義的七級至八級為宜。實驗室人工照明應(yīng)均勻,不眩目,照度不低于500lx。
4.為確保實驗室內(nèi)的氣流由“清潔”區(qū)域流向“污染”區(qū)域,實驗室內(nèi)不應(yīng)使用雙側(cè)均勻分布的排風(fēng)口布局。不應(yīng)采用上送上排的通風(fēng)設(shè)計。由生物安全柜排出的經(jīng)內(nèi)部高效過濾的空氣可通過系統(tǒng)的排風(fēng)管直接排至大氣,也可送入建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)。應(yīng)確保生物安全柜與排風(fēng)系統(tǒng)的壓力平衡。
5.實驗室的進風(fēng)應(yīng)經(jīng)初、中、高效三級過濾。
6.實驗室的排風(fēng)必須經(jīng)高效過濾或加其他方法處理后,以不低于12m/s的速度直接向空中排放。該排風(fēng)口應(yīng)遠離系統(tǒng)進風(fēng)口位置。處理后的排風(fēng)也可排入建筑物的排風(fēng)管道,但不得被送回到該建筑物的任何部位。
7.進風(fēng)和排風(fēng)高效過濾器必須安裝在實驗室設(shè)在圍護結(jié)構(gòu)上的風(fēng)口里,以避免污染風(fēng)管。
8.實驗室的通風(fēng)系統(tǒng)中,在進風(fēng)和排風(fēng)總管處應(yīng)安裝氣密型調(diào)節(jié)
閥門,必要時可完全關(guān)閉以進行室內(nèi)化學(xué)熏蒸消毒。
9.實驗室的通風(fēng)系統(tǒng)中所使用的所有部件均必須為氣密型。所使用的高效過濾器不得為木框架。
10.應(yīng)安裝風(fēng)機啟動自動聯(lián)鎖裝置,確保實驗室啟動時先開排風(fēng)機后開送風(fēng)機。關(guān)閉時先關(guān)送風(fēng)機后關(guān)排風(fēng)機。
11.不得在實驗室內(nèi)安裝分體空調(diào)器。
其他注意事項
1.實驗臺表面應(yīng)不透水,耐腐蝕、耐熱。
2.實驗室中的家具應(yīng)牢固。為易于清潔,各種家具和設(shè)備之間應(yīng)保持一定間隙。應(yīng)有專門放置生物廢棄物容器的臺(架)。家具和設(shè)備的邊角和突出部位應(yīng)光滑、無毛刺,以圓弧形為宜。
3.所需真空泵應(yīng)放在實驗室內(nèi)。真空管線必須裝置在線高效過濾器。
4.壓縮空氣等鋼瓶應(yīng)放在實驗室外。穿過圍護結(jié)構(gòu)的管道與圍護結(jié)構(gòu)之間必須用不收縮的密封材料加以密封。氣體管線必須裝置在線高效過濾器和防回流裝置。
5.實驗室中應(yīng)設(shè)置洗眼裝置。
6.實驗室出口應(yīng)有發(fā)光指示標(biāo)志。
7.實驗室內(nèi)外必須設(shè)置通訊系統(tǒng)。
8.實驗室內(nèi)的實驗記錄等資料應(yīng)通過傳真機發(fā)送至實驗室外。