實驗動物分級及其標準
根據(jù)實驗動物微生物控制標準,可將實驗動物分為四級:
一級 普通動物(CV),系指微生物不受特殊控制的一般動物。要求排除**共患病的病原體和積少數(shù)的實驗動物烈性傳染病的病原體。為防止傳染病,在實驗動物飼養(yǎng)和繁殖時,要采取一定的措施,應保證其用于測試的結果具有反應的重現(xiàn)性(即無論不同的操作人員,在不同的時間,用同一品系的動物按規(guī)定的實驗規(guī)程所做的實驗,都能獲得幾乎相同的結果)。
二級 清潔動物(CL),要求排除**共患病及動物主要傳染病的病原體。
三級 無特殊病原體動物(SPF),要求到二級外,還要排除一些規(guī)定的病原體。其除菌與滅菌的方法,可使用高效空氣過濾器除菌法、紫外線滅菌法、三甘醇蒸氣噴霧法及氯化鋰水溶液噴霧法。
四級 無菌動物(GF)或悉生動物(GN)。無菌動物要求不帶有任何用現(xiàn)有方法可檢出的微生物。悉生動物要求在無菌動物體上植入一種或數(shù)種已知的微生物。
在病理學檢查上,四類實驗動物也有不同的病理檢查標準。
一級 外觀健康,主要器官不應有病灶。
二級 除一級指標外,顯微鏡檢查無二級微生物病原的病變。
三級 無特殊病原體動物。無二、三級微生物病原的病變。
四級 不含二、三級微生物病原的病變,脾、淋巴結是無菌動物組織學結構。
綜合上述,對不同級別的實驗動物在動物房設計上和管理上則有不同的要求。
無菌、已知菌以及無特殊病原體動物都需要在無菌或盡可能無菌的環(huán)境里飼養(yǎng),這種環(huán)境,目前國際上通用稱為屏障環(huán)境,即用一道屏障把動物與周圍污染的環(huán)境隔開,就如胎鼠在母鼠子宮內一樣。這種環(huán)境從控制微生物的角度分為隔離系統(tǒng)、屏障系統(tǒng)、半屏障系統(tǒng)、開放系統(tǒng)和層流架系統(tǒng)等五大類。
A 隔離系統(tǒng)
是在帶有操作手套的容器中飼養(yǎng)動物的系統(tǒng),用于飼養(yǎng)無菌動物和棲生動物。內部保持按微生物要求的100級的潔凈度,但其設置的房間及操作人員不必按無菌室考慮。
B 屏障系統(tǒng)
把10000~100000級左右的無菌潔凈室作為飼養(yǎng)室,主要用于無特殊病原體動物的長期飼養(yǎng)和繁殖。入室施行嚴格管理,如淋浴、換貼身衣服等。
C 半屏障系統(tǒng)
放寬對屏障系統(tǒng)中人及物出入房間時的管理,平面組成大致與屏障系統(tǒng)相同。
D 層流架系統(tǒng)
籠具放在潔凈的水平層流空氣中。常用于小規(guī)模飼養(yǎng),但在一般房間進行飼養(yǎng)、操作和處理時有被污染的危險性??捎糜诎肫琳系难a充。
E 開放系統(tǒng)
是對人、物、空氣等進出房間均不施行消除污染的系統(tǒng),但通常要進行某種程度的清潔管理。
達到動物房環(huán)境指標的凈化措施有:
A.空氣凈化系統(tǒng)
因為動物房是實驗動物較長時間活動的場所,室內不可能在飼育條件下經常用薰蒸沖洗的方式滅菌,一般只能用藥力較弱的消毒液檫洗,在這種情況下為了避免微生物侵染,保證空氣凈化則是首要條件;
B.全新風
防止交*污染和除臭是兩個難題,為此,凈化空調系統(tǒng)大部分必須采用全新風方式,但由于凈化系統(tǒng)換氣次數(shù)大,又是全新風,所以能耗問題突出;
C.除臭
這不僅是對外部環(huán)境和工作人員所必須,而且也是實驗動物本身所必須。因為室內除外界微生物污染外,動物本身排泄物和微生物二次轉化生成的氨、硫化氫、醇等氣體,也是重要的污染物質,這些氣體臭味愈濃烈,說明動物本身的潔凈度愈低。目前還無臭氣允許值的定量資料和測定方法,但對于氨濃度應進行控制。除臭一般有增加新風和活性炭吸附兩種方法。
動物房一般環(huán)境因子控制范圍:
(1) 溫度 目標值為21~27℃。藥典規(guī)定為17~28℃??梢騽游锲贩N而不同。
(2) 濕度 45%~55%。衛(wèi)生部規(guī)定為40%~60%。
(3) 氣流速度 10~25cm/s。避免直接吹風。
(4) 換氣次數(shù) 6~15次/h。新風為2/3。
(5) 氣壓 潔凈區(qū)正壓,感染區(qū)負壓。
(6) 環(huán)境潔凈級別 一般動物飼養(yǎng)室大于100000級。
(7) 照明 150~300lx(人工照明)。
(8) 噪音 40~50dB(無動物時),有動物時為60 dB,衛(wèi)生部規(guī)定小于70 dB。 (9) 臭氣 氨20ppm。
動物房設計的基本要求
(1) 選址 僻靜、衛(wèi)生
(2) 布置 分為準備區(qū)、飼養(yǎng)區(qū)、實驗區(qū)。要求人流、物流、動物流分開(單向流程);要求凈化、滅菌、防蟲。
(3) 建筑 要求有潔凈走廊,飼養(yǎng)室,污染走廊以及其他各室。
(4) 空調系統(tǒng) 有可控制的溫度和濕度、氣流速度和分布,有一定的換氣量和氣壓。
(5) 照明 無窗動物房使用熒光燈,有窗動物房可安裝玻璃窗,以濾去紫外線。要求12h亮,12h暗。
(6) 供水 有飲用水和精制水。
四.動物房的設置
根據(jù)不同種類和不同級別實驗動物的需要,建立相應設施的動物房、活動場所和相應的輔助用房。場址應選在能保持安靜、清潔、無不良外界影響的地方。
動物房必須光線充足、通風良好、地面整潔,不積水;頂棚、墻壁要易于清潔、消毒;外墻、屋頂、頂棚、門窗及通外面的管道等必須杜絕外界動物、蚊蠅及其它蟲害鉆入。室內溫度控制在18~29℃,相對濕度40%~70%,噪音60 dB以內。
籠內動物密度不能太大,要有送風、排風、降溫及保暖設備。必須有專用的排污、排水設施,防止病原擴散。各種籠具要定期清洗消毒,墊料須經高溫高壓或藥物消毒并及時更換,使室內氨濃度在15 mg/m3以下。