基本建設(shè)一個微生物實驗室,通常是由提前準(zhǔn)備室、清洗室、殺菌室、無菌車間、控溫培養(yǎng)室和一般試驗室六一部分構(gòu)成。微生物實驗室的設(shè)計應(yīng)該滿足哪些條件?
微生物實驗室需要滿足四個功能區(qū)
(一)準(zhǔn)備室
制備室用于制備培養(yǎng)基和樣品處理等。有試劑室、儲存器具或材料的專用柜臺、
實驗臺、電爐、冰箱、下水道、電源等。
(二)洗滌室
洗滌室用于洗滌器具等。因為用過的器具已經(jīng)被微生物污染,所以病原微生物有時會存在。因此,如果條件允許,最好建一個洗澡間。房間應(yīng)配備加熱器、蒸汽鍋、洗滌器皿的盆和桶,以及各種瓶刷、洗衣粉、肥皂、洗衣粉等。
(三)滅菌室
滅菌室主要用于培養(yǎng)基的滅菌和各種儀器的滅菌。室內(nèi)應(yīng)配備高壓蒸汽滅菌器、烘箱等滅菌設(shè)備和設(shè)施。
(四)無菌室
無菌室一般是一個獨立的小房間(與外界隔離),面積4-5平方米,高2.5米,專門設(shè)置在微生物實驗室。
無菌室也叫接種室,是用于系統(tǒng)接種、細(xì)菌純化和其他無菌操作的專用實驗室。菌株的接種和移植是微生物學(xué)工作中的一項主要操作。這種操作的特點是確保純菌株和防止雜菌株的污染。在一般環(huán)境的空氣中,由于存在許多灰塵和雜菌,很容易造成污染,極大地干擾了疫苗接種工作。
無菌室應(yīng)根據(jù)經(jīng)濟(jì)和科學(xué)原則設(shè)置。一個好的無菌實驗室應(yīng)該滿足其基本要求,那么基本要求是什么?
無菌實驗室設(shè)置的四大要求?
(1)無菌室應(yīng)該有兩個房間,一個在里面,另一個在外面。內(nèi)室是無菌室,外室是緩沖室。房間容積不應(yīng)太大,以免影響空氣消毒。最小內(nèi)部面積為2× 2.5 = 5m2,外部面積為1× 2 = 2m2,高度應(yīng)小于2.5m,要求吊頂。
(2)內(nèi)部房間應(yīng)安裝滑動門,以減少空氣波動。門應(yīng)位于離工作臺最遠(yuǎn)的位置。外門最好使用滑動門,滑動門應(yīng)位于離內(nèi)室最遠(yuǎn)的位置。
(3)應(yīng)在墻壁上開一個小窗口或分隔內(nèi)、外房間的“隔板”,作為接種過程中貨物內(nèi)外轉(zhuǎn)移的必要通道,以減少人員進(jìn)出內(nèi)房間的次數(shù),降低污染程度。小窗寬60厘米,高40厘米,厚30厘米,內(nèi)外都掛著相對的窗扇。
(4)無菌室體積小而緊湊。使用一段時間后,室內(nèi)溫度很高,所以應(yīng)該設(shè)置通風(fēng)窗。通風(fēng)窗應(yīng)設(shè)置在內(nèi)室入口處(即離工作臺最遠(yuǎn)的位置)的天花板上,優(yōu)選為雙層結(jié)構(gòu),外層為百葉窗,內(nèi)層為板式窗扇。通風(fēng)窗可以在內(nèi)室使用后和消毒前打開,以循環(huán)空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機(jī)。
無菌室內(nèi)設(shè)備和用具
(1)無論無菌室的工作臺由什么材料和用途制成,都需要光滑的表面和水平的桌面。
(2)在內(nèi)室和外室分別安裝紫外線燈(大多為30W)。內(nèi)室的紫外線燈應(yīng)安裝在經(jīng)常工作的座位正上方,離地面2m,外室的紫外線燈可安裝在外室中央。
(3)外部房間應(yīng)配備特殊的工作服、鞋、帽、口罩、瓷罐和毛巾,內(nèi)含溶酶體水、手持式噴霧器和5%的石炭酸溶液等。
(4)酒精燈、普通接種工具、不銹鋼刀、剪刀、鑷子、70%酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻片、專用蠟筆、筆記本、鉛筆、標(biāo)簽紙、膠水、廢紙簍等。應(yīng)設(shè)置在內(nèi)室中。
無菌室的滅菌消毒
(1)熏蒸:這是對無菌室進(jìn)行徹底消毒的措施。無菌室已經(jīng)使用了很長時間,污染嚴(yán)重時應(yīng)該熏蒸消毒??捎眉兹⑷樗峄蛄蚧寝拐?。
(2)噴灑:每次使用無菌室前。噴霧能促進(jìn)空氣中顆粒和微生物的沉淀,防止桌面和地面上的灰塵飛散到田間,具有殺菌作用。噴灑5%的石炭酸。
(3)紫外線照射:每次使用無菌室前。紫外線殺菌效果更好。通常應(yīng)開啟紫外線燈照射30~60min。
無菌室工作規(guī)程
(1)無菌室內(nèi)滅菌。每次使用前,打開紫外線燈照射30分鐘以上,或在使用前用5%石炭酸噴灑內(nèi)外腔30分鐘。
(2)用肥皂洗手后,將所需設(shè)備移入外間;在外間穿上消毒的工作服、工作帽和工作鞋,戴上口罩,然后用2%的煤苯酚肥皂溶液洗手2分鐘。
(3)將所需的各種物品移入內(nèi)室進(jìn)行計數(shù)和定位,在工作臺上方和操作臺空間噴灑5%的石炭酸,返回外室,5 ~ 10分鐘后在內(nèi)室工作。
(4)接種前用70%酒精棉球擦手;進(jìn)行無菌操作時,動作應(yīng)輕柔緩慢,以盡量減少空氣波動和地面灰塵。
(5)注意工作安全。萬一衛(wèi)生棉條著火了,用手緊緊握住,或者用濕布包起來滅火。不要用嘴吹,以免進(jìn)一步燙傷。如果細(xì)菌培養(yǎng)物掉落或損壞細(xì)菌容器,用浸有5%石炭酸的布包裹,用浸有5%石炭酸的布擦拭桌面或地板,然后用酒精棉球擦手后繼續(xù)操作。
(6)工作完成后,立即清理桌子。將所有不應(yīng)存放在無菌室內(nèi)的物品和廢物從無菌室內(nèi)取出后,向無菌室內(nèi)噴灑5%的石炭酸或打開紫外線燈30分鐘。