所謂組合形式PCR實驗室, 是指完成PCR四個實驗過程的實驗用房相鄰布置,組成獨立實驗區(qū)域的形式。對于組合形式PCR實驗室,由于各個實驗間集中布置,容易造成相互干擾,因此,對總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間,以減少室內(nèi)外空氣交換。試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓,以防外界含核酸氣溶膠的空氣進入,造成污染;核酸擴增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負壓,以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品。
PCR實驗室建設(shè)一般結(jié)構(gòu):
一、主體結(jié)構(gòu)
主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁,從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。結(jié)構(gòu)牢固,線條簡明,美觀大方,密封性好。 二、標準的三區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)
將PCR過程分成試劑準備、標本制備和PCR擴增檢測三個獨立的實驗區(qū)。整個區(qū)域有一個整體緩沖走廊。每個獨立實驗區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū), 同時各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié),使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。
可打開緩沖區(qū)Ⅰ,緩沖區(qū)Ⅱ和 PCR 擴增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣,在實驗區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口,空氣通過回風(fēng)口向室內(nèi)換氣。
三、消毒
在三個實驗區(qū)和三個緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈,供消毒用。 在試劑準備區(qū)和標本制備區(qū) 還設(shè)置移動紫外線燈,對實驗桌進行局部消毒。 四、機械連鎖不銹鋼傳遞窗
試劑和標本通過機械連鎖不銹鋼(不建議使用電子連鎖方式)傳遞窗傳遞,保證試劑和標本在傳遞過程中不受污染(人物分流)。
五、地面
地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面,整體性好。便于進行清掃,耐腐蝕。沒有條件的也可采用水磨石地面,或大塊的瓷磚(至少800mm×800mm)接縫需要小于2mm。
六、照明
燈具要選用凈化燈具,能達到便于清洗、不積塵的特點。
PCR實驗室工作區(qū)域儀器設(shè)備配置標準:
(1)試劑貯存和準備區(qū) 2~8℃和-15℃冰箱:混勻器;微量加樣器(覆蓋1~1000μl);移動紫外燈(近工作臺面);消耗品:一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心);專用工作服和工作鞋;專用辦公用品等。
(2)標本制備區(qū) 2~8℃冰箱,-20℃或-80℃冰箱;高速臺式冷凍離心機;混勻器;水浴箱或加熱模塊;微量加樣器(覆蓋1~1000μl);可移動紫外燈(近工作臺面);超凈工作臺,消耗品;一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心);專用工作服和工作鞋;專用辦公用品等。
(3)擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)核酸擴增儀;微量加樣器(覆蓋1~1000μl);可移動紫外燈(近工作臺面);消耗品:一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心);專用工作服和工作鞋;專用辦公用品等。
(4)擴增產(chǎn)物分析區(qū)視檢測方法不同而定?;緝x器設(shè)備如下:微量加樣器(覆蓋1~200μl);可移動紫外燈(近工作臺面);消耗品:一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心);專用工作服和工作鞋;專用辦公用品等。
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